Single nucleotide polymorphisms of the heat shock protein 90 gene in varicocele-associated infertility

PURPOSE: Varicoceles are associated with impaired testicular function and male infertility, but the molecular mechanisms by which fertility is affected have not been satisfactorily explained. Spermatogenesis might be affected by increased scrotal temperature, such as that caused by varicocele. HSP90 is a molecular chaperone expressed in germ cells and is related to spermatogenesis, motility, and both heat and oxidative stress. Possible correlations between coding single region nucleotide polymorphisms (cSNPs) in the HSP90 gene in patients with varicocele associated with infertility were analyzed, and polymorphisms in these exons were characterized through DNA sequencing. MATERIALS AND METHODS: PCR-SSCP and DNA sequencing were used to search for mutations in 18 infertile patients with varicocele, 11 patients with idiopathic infertility and 12 fertile men. DNA was extracted from leucocytes for PCR amplification and SSCP analysis. DNA from samples with an altered band pattern in the SSCP was then sequenced to search for polymorphisms. RESULTS: Three silent polymorphisms that do not lead to amino acid substitutions were identified. CONCLUSION: Mutations in the HSP90 gene do not appear to be a common cause of male factor infertility. The low incidence of gene variation, or SNPs, in infertile men demonstrates that this gene is highly conserved and thus confirms its key role in spermatogenesis and response to heat stress.

Aplicaçäo da cromatografia líquida de alta eficiência na determinaçäo de estrôgenios eqüinos / The use of high-performance liquid chromatography for the determination of equine estrogens

Os estrogênios eqüinos, amplamente empregados na terapia de reposição hormonal em mulheres menopausadas, são encontrados em formulações de concentrações pré-estabelecidas disponíveis comercialmente. No presente trabalho, 17`alfaï-diidroeqüilina (A), eqüilina (Eq) e estrona (E1) foram determinadas empregando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com separação por fase reversa e detecção por ultravioleta em 220, 230 240 e 280 nm. Utilizou-se coluna cromatográfica ODS HYPERSIL©, fase móvel composta de água-acetronitrila (60:40 v/v) com fluxo de 1,0 mL/min. A testosterona foi utilizada como padrão de referência (tR = 4,6 min)...

Resposta esteroidogênica induzida por hCG em garanhöes jovens Mangalarga: testosterona e sulfato de estrona plasmáticos / HCG induced steroidogenic response in Mangalarga young stallions: plasma testosterone and estrone sulphate

Avaliou-se a resposta esteroidogênica aguda da célula de Leydig em sete garanhöes jovens da raça Mangalarga (2,6 a 4,5 anos), através de estimulaçäo com gonadotrofina coriônica humana (hCG). Os animais foram tratados com 5.000 UI (hCG) Vetecorr, i.v., in bollus, às 8 horas. Amostras de plasma foram obtidas por venopuntura às 7 horas (basal), 4, 24, 48, 72 horas pós-estímulo (28 a 31 de agosto). Testosterona (T) e sulfato de estrona (E1SO4) foram dosados por radioimunoensaio (RIE) c.v. £ 5 por cento. Os dados foram analisados pelos testes Friedman e Wilcoxon Matched-Pairs Signed Ranks (p £ 0,05). A magnitude da produçäo hormonal após o estímulo foi calculada pela Variaçäo Percentual (D por cento). As 48 horas do teste, 57,1 por cento dos animais (n = 4) apresentaram pico de T com um aumento de 5,7 vezes com relaçäo ao basal. Embora em 57,1 por cento (n = 4) tenha ocorrido a resposta máxima de E1SO4 às 4 horas, o valor máximo foi de 1,6 vez às 24 horas. A hCG pode ser empregada para estimular a resposta esteroidogênica da célula de Leydig e a dose de 5.000 UI é suficiente para estimular a esteroidogênese testicular. Em condiçöes basais, as concentraçöes plasmáticas de estrógenos säo superiores às dos andrógenos. Este protocolo pode ser usado para identificar problemas de origem endócrina em cavalos desta raça